基因工程凈化車間抗體的分離純化

抗體是一種特殊的蛋白質(zhì)分子，被用作體外診斷試劑、免疫親和層析的配基等，在生命科學(xué)研究、生物技術(shù)及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中有廣泛應(yīng)用，尤其是抗體作為各種免疫分析的核心試劑，對免疫分析結(jié)果的靈敏度、特異性起著重要的作用；不論用什么方法產(chǎn)生抗體，都需要在后期對抗體進(jìn)行分離和純化，所以根據(jù)抗體，選擇合適的分離純化方式是十分重要的。

層析技術(shù)是抗體分離純化的核心技術(shù)，一般采用三步純化策略：粗純、中間純化和精細(xì)純化，其中粗純主要目的是捕獲、濃縮和穩(wěn)定樣品，粗純一般使用蛋白A和蛋白G親和層析，并且一步即可達(dá)到95%以上的純度；中間純化和精細(xì)純化去除特定的雜質(zhì)，如宿主蛋白、DNA、聚集體和變體等，常用的層析技術(shù)有離子交換、疏水層析等，從而達(dá)到最終治療用抗體所需的純度。用凝膠多慮純化抗體時，將含有抗體的樣品通過裝有多孔性介質(zhì)填料的層析柱中，收集流出的抗體組分；當(dāng)樣品從層析柱的頂端向下運(yùn)動時，大的抗體分子不能進(jìn)入凝膠顆粒而迅速洗脫，小的抗體分子能夠進(jìn)入凝膠顆粒，其在凝膠柱中的遷移被延緩；抗體分子從凝膠過濾柱洗脫的先后順序一般是按照分子量的大小由高到低。中凈環(huán)球凈化可提基因工程車間、GMP車間的咨詢、規(guī)劃、設(shè)計(jì)、施工、安裝、改造等配套服務(wù)。

抗體或者抗體片段通常是從天然或重組體系中提取的，來源的選擇會影響到樣品處理和純化的步驟，因?yàn)椴煌瑏碓吹碾s質(zhì)和需要的目標(biāo)分子純度是不同的，通常情況下，會選擇一個目標(biāo)分子高度親和的柱子并能夠一步得到高純度的樣品，且盡可能的減少污染；根據(jù)不同的目標(biāo)和條件，可以采用比較適宜的方法對所要制備的抗體進(jìn)行純化。

本文由中凈環(huán)球凈化CCG(www.sz-u77.com)提供，轉(zhuǎn)載請注明出處。