無菌車間標準化技術要求

  無菌車間應設有無菌操作間和緩沖間，無菌操作間潔凈度應達到10000級，室內溫度保持在20-24℃，濕度保持在45%-60%，超凈臺潔凈度應達到100級；應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染；嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用；無菌車間應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證潔凈度符合要求；工作人員進入無菌車間前，必須用消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用工作服、鞋、帽子、口罩和手套，方可進入無菌車間進行操作；無菌車間使用前必須打開紫外線燈等輻照滅菌30min以上，并且同時打開超凈臺進行吹風，操作完畢，應及時清理無菌車間，再用紫外線等輻照滅菌20min；供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染，檢查前用質量分數為70%的酒精棉球消毒外表面。

  吸取菌液時，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管；接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物；帶有菌液的吸管、試管、培養皿等器皿應在浸泡在盛有質量分數為5%的來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24H后取出沖洗；凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。無菌車間應每月檢查菌落數，在超凈工作臺開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌培養皿若干，無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15ML，放至凝固后，倒置于30-35℃培養箱培養48H，證明無菌后，取平板3-5個，分別放置工作位置的左、中、右等處，開蓋暴露30min后，倒置于30-35℃培養箱培養48H，取出檢查，100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級潔凈區平均不得超過3個菌落，如超過限度，應對無菌車間進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。中凈環球凈化可提供無菌車間、無菌室的咨詢、規劃、設計、施工、安裝、改造等配套服務。

  在獲得了無菌環境和無菌材料后，還要保持無菌狀態，才能對某種特定的已知微生物進行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入；防止污染是微生物學工作中十分關鍵的技術，一方面是徹底滅菌，另一方面防止污染，這是無菌技術的兩個方面；無菌車間外要設一個緩沖間，緩沖間的門和無菌車間的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進雜菌，室內裝備的換氣設備必須有空氣過濾裝置；無菌車間的地面、墻壁必須平整，不易藏污納垢，便于清洗，工作臺的臺面應該處于水平狀態，工作人員進入無菌車間應穿滅過菌的服裝、戴帽子。

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